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人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒

简要描述:售后:我公司具有优质的技术团队,人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒一旦售出,产品仅用于科研实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。

  • 产品型号:GOY-0001E
  • 厂商性质:
  • 更新时间:2022-11-24 16:47:40
  • 访  问  量:50

详细介绍

产品属性:

            产品名称        英文名称           规格
             货号
人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒 
Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit
       48T/96T
     GOY-0001E

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人原钙黏素1(PCDH1)水平。用纯化的人原钙黏素1(PCDH1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人原钙黏素1(PCDH1)),再与HRP标记的人原钙黏素1(PCDH1))抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人原钙黏素1(PCDH1))呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人原钙黏素1(PCDH1)浓度。 
试剂盒组成:

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(80pg/ml

0.5ml×1

3

标包被

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

试剂配制:

1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。

2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

1.jpg

操作步骤:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。


40pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

20pg/ml

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

10pg/ml

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

5pg/ml

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

2.5pg/ml

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液


2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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