样本要求：

　　1.适用标本类型：发病动物血液、空肠及小肠肠内容物及组织脏器(肠道组织、肠系膜及淋巴结等)和病毒培养液。

　　2.标本采集，方法如下：

　　(1)血清：用一次性注射器取静脉血2-3ml，转至5ml的干燥管中，密闭送检。

　　(2)肠内容物：无菌条件下取肠道内容物约1g左右，置入1ml含有1.0mlPBS(或生理盐水)的5ml离心管中，立即送检。

　　(3)组织脏器：取发病动物肠道组织及肠系膜淋巴结等组织约1g，置一1.5ml的洁净离心管中，密闭送检。

　　3.应避免标本间交叉污染。

　　4.标本收集后可立即检测；若不能立即检测，可置于2～8℃冷藏保存；如需长期保存，标本应冻存于-80℃以下，避免反复冻融。

　　实时荧光PCR试剂盒注意事项：

　　1、整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。

　　2、为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。

　　3、每次实验应该设置阴、阳性对照。

　　4、试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。

　　5、试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。